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過(guò)濾法-顯微鏡下菌落計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)總菌數(shù)操作步驟

信息分類：生命科學(xué)資訊　　　　作者:YIYI發(fā)布　

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目的
利用過(guò)濾大量液體樣品，如：飲用水等測(cè)定方法，以了解樣品之生菌數(shù)。

原理
使用細(xì)菌無(wú)法通過(guò)但液體可通過(guò)的無(wú)菌濾膜(045 μm)，將濾膜裝設(shè)于濾器內(nèi)且套入三角錐形瓶，
待真空抽氣過(guò)濾后，細(xì)菌就會(huì)滯留于濾膜上。接著以無(wú)菌操作技術(shù)將濾膜移至選擇或鑑別培養(yǎng)基上，經(jīng)培養(yǎng)后，可計(jì)數(shù)濾膜上之菌落數(shù)以了解樣品之衛(wèi)生程度

材料
無(wú)菌水或無(wú)菌085%生理食鹽水
平板空白培養(yǎng)基


設(shè)備儀器及其他用具
無(wú)菌鑷子
過(guò)濾裝置
濾膜(045 μm)
恒溫培養(yǎng)箱
菌落計(jì)數(shù)器
真空幫浦
滅菌容器


步驟與方法
此方法之操作流程如下：
準(zhǔn)備樣品溶液：以滅菌容器量取樣品溶液至少20 ml。
過(guò)濾樣品溶液：裝置過(guò)濾器材后，以無(wú)菌鑷子將濾膜置于漏斗的底部上，而濾膜之格網(wǎng)面朝上。
將濾器漏斗與底座扣住。取10 ml樣品溶液注入漏斗中，啟動(dòng)抽氣過(guò)濾。待樣品過(guò)濾后，漏斗內(nèi)層以無(wú)菌水洗滌。
濾膜置于平板：中止真空抽氣（務(wù)必抽乾）后，松開(kāi)漏斗，以無(wú)菌鑷子取出濾膜，置于平板空白培養(yǎng)基上。

細(xì)菌培養(yǎng)及菌落的計(jì)數(shù)：將培養(yǎng)皿倒置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中，經(jīng)24~48小時(shí)培養(yǎng)后以肉眼或于顯微鏡下觀察，
并使用菌落計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)總菌數(shù)。


實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)
若最后觀察之菌落數(shù)濃度過(guò)濃時(shí)，可適當(dāng)?shù)挠脽o(wú)菌水或生理食鹽水稀釋。
中止真空抽氣時(shí)，需確認(rèn)已完全抽乾才可停止，否則會(huì)影響結(jié)果。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果
觀察濾膜的生長(zhǎng)狀況并計(jì)算其菌落數(shù)。
本文由出自上海光學(xué)儀器廠，轉(zhuǎn)載請(qǐng)注明
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