顯微鏡下觀察骨切片的細胞結(jié)構(gòu)制作實驗
骨切片之制作 Bone Section
骨頭本性堅硬,若欲以切片機切片則需先去除石灰質(zhì),即脫鈣(decalcification) ,其中最常用
的方法為酸處理法,步驟較為繁瑣且費時。此外,也可以利用磨刀石制成骨薄片,
是為制作骨切片標本最簡便的方法,但較費力
材料
(1) 材料準備:單面刀片、線鋸、磨刀石、大盆子、圭筆、固定瓶、吸管、載玻片、
蓋玻片、顯微鏡、小培養(yǎng)皿、解剖針、濾紙、40°C恒溫箱、封片用紙板、藥品及容器、標簽及鉛筆。
(2) 藥品準備:10%福馬林、50% Alcohol、75% Alcohol、85% Alcohol、95% Alcohol、100% Alcohol
、Xylene、Hematoxylin、Eosin、 Dist. Water、0.5% HCl acid H2O、
Permount? mounting medium
取材與固定:
→利用刀片等工具刮除骨肉
→以薄刀口之鋸子切骨頭成小片(硬骨約2-5 mm,較軟之骨約4-6 mm)
→將骨頭片置于粗面磨刀石上磨至約1 mm厚
→置入裝有10%福馬林之固定瓶中固定約4-24小時
→以水徹底沖洗去除固定液
→將置骨頭片于細面磨刀石上磨至透明
→使用規(guī)筆清掃水中之骨頭片以去除卡在細胞間的砂石
→置入70%乙醇中保存