細(xì)胞培養(yǎng)-顯微鏡下以聚合針于液滴中壓制
聚合盤(pán)(Aggregation plate)制備
儀器
1. 聚合針 (aggregation needle, DN-09, BLS)
2. 解剖顯微鏡
3. 細(xì)胞培養(yǎng)箱 (37℃, 5% CO2)
材料
1. 礦物油 (e.g., Sigma M8410)
2. 70% 酒精
3. M16 胚胎培養(yǎng)液
4. 35-mm 細(xì)胞培養(yǎng)皿
實(shí)驗(yàn)步驟
1. 取數(shù)滴 10~15ml M16 胚胎培養(yǎng)液于 35-mm 細(xì)胞培養(yǎng)皿制作出直徑約 3 mm 的液滴。
2. 將液滴蓋上礦物油。
3. 以 70﹪酒精擦拭聚合針,于解剖顯微鏡下以聚合針于液滴中壓制出凹洞。
4. 將制備好的聚合盤(pán)放回細(xì)胞培養(yǎng)箱中備用