熒光顯微鏡的不同的光源設(shè)計都有哪些應用
信息分類：生命科學資訊 作者:YIYI發(fā)布
熒光顯微鏡的不同的光源設(shè)計都有哪些應用
熒光顯微鏡
熒光顯微鏡（fluorescence microscope ）觀察由短波光（紫外、紫、藍等）激發(fā)
的生物物質(zhì)或經(jīng)熒光劑（熒光染料）標記（或染色）的物質(zhì)所發(fā)生的熒光。它應具備以
下條件：①能產(chǎn)生短波光的光源（如高壓汞燈、高壓氙燈等，過去也有用弧光燈或在采
用藍激發(fā)光時用強碘鎢燈者）。②激發(fā)濾光片。用于選擇激發(fā)光的波長范圍，安置于光
源與聚光鏡之間。常用的激發(fā)濾光片有紫外（UV）濾光片（激發(fā)光波長主要在334 ～365nm
之間），紫（V ）濾光片（激發(fā)光波長大部為405 ～430nm ），藍（B ）濾光片（激發(fā)
光主要為藍色，也包括一部份紫光，其波長可為405 ～435 至490nm 之間）。偶也有用
綠（G ）濾光片者（激發(fā)波長在546nm 左右）。③聚光鏡、載玻片、蓋玻片及物鏡應盡
可能少吸收而允許紫外線通過。④吸收（護目）濾光片，置于標本與目鏡之間或罩于目
鏡上，用以阻擋紫外光只允許熒光進入眼球。有橙（OG）與綠（GG）等幾種。一般用B
激發(fā)濾光片者可配用OG吸收濾光片；用UV激發(fā)濾光片者可配用GG吸收濾光片。⑤載玻片、
蓋玻片、封蓋介質(zhì)、鏡油等應不具有熒光雜質(zhì)。⑥標本的固定、包埋等處理應能保存組
織中的熒光物質(zhì)或不產(chǎn)生非特異性熒光。⑦熒光顯微鏡應在暗室內(nèi)觀察，或在目鏡上安
裝遮光罩，以阻擋外來光干擾。
熒光顯微鏡的裝置有透射和落射兩種。過去透射式裝置的熒光顯微鏡與普通顯微鏡
相似，其短波的激發(fā)光可以射入物鏡�，F(xiàn)在利用暗視野聚光鏡裝置，不使激發(fā)的短波光
直射入物鏡，而使其折光斜射于標本上，只有激發(fā)的熒光進入物鏡。這種熒光顯微鏡在
低倍鏡下比較明亮，效果較好，高倍鏡時則較暗。不過其視野背景較暗，與熒光的對比
較好。落射式裝置的熒光顯微鏡，因其物鏡起了聚光鏡的作用，所以視野的光均勻，且
高倍時明亮，便于觀察。
使用熒光顯微鏡的注意事項：①光源應安裝穩(wěn)壓器，以保持電壓穩(wěn)定。②注意光源
燈室，不要碰撞、漏光。如高壓汞燈等高壓光源一次啟動不成，或關(guān)燈以后，需待半小
時再啟動使用。③長時間的激發(fā)光照射可使熒光衰減或消失，所以應盡量縮短觀察時間，
暫不觀察期間應遮斷激發(fā)光的照射。
本文由出自上海光學儀器廠，轉(zhuǎn)載請注明
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