泥樣中細(xì)菌的熒光計(jì)數(shù)-將封片放于
熒光顯微鏡下觀察
泥樣中細(xì)菌的熒光計(jì)數(shù)法熒光至少染色的高度稀釋的染液中
作用40-60 分鐘,不影響細(xì)菌生長(zhǎng),可作為活菌染色。根據(jù)菌體熒光
染色或光亮度不同區(qū)別死活菌,用蝊橙染色,活菌呈綠色熒光,死菌
發(fā)戲色熒光,關(guān)死狀態(tài)發(fā)橙黃色熒光,染色計(jì)算時(shí)應(yīng)作死菌對(duì)照。
1.配制0.1%焦磷酸納水溶液,通過(guò)4 號(hào)濾膜過(guò)濾。
2.在10克泥樣中,無(wú)菌地取出中央部分約1 克,立即稱(chēng)好余泥的
重量,計(jì)算取出的泥樣重量。
3.將1 克泥燕放入50毫升焦磷酯納溶液蓋好瓶蓋,振20分鐘成懸
液。
4.用無(wú)菌吸管分別取懸液9 毫升,各加到3 個(gè)無(wú)菌試管愉,編艱
標(biāo)簽。
5.在試管中分別加入1.0 和11毫升的啶橙溶液(1/10000 )作用
數(shù)分鐘。
6.另取毫升懸液在試管中煮沸10分鐘,殺死細(xì)菌,加1 毫升啶橙
溶液。
7.各取0.01毫升上述的兩種染色菌液于無(wú)菌載玻片上,涂成1 厘
米見(jiàn)方(先用臘筆劃好范圍),加上蓋玻片,旁邊用凡土林封起來(lái)。
8.將封片放于熒光
顯微鏡下觀察,計(jì)算呈現(xiàn)綠色光點(diǎn),即是活菌
數(shù),注意所制死菌片的觀察對(duì)照。